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AMI:利用蛋白质生物合成的生物正交代谢标记法动态观察非包膜肠道病毒71感染

先知报道
2020-01-14


通过内源性细胞代谢途径(如磷脂和糖)进行生物正交代谢标记是有效标记活病毒的一种很有前途的方法。然而,由于缺乏宿主来源的包膜,标记无包膜病毒仍然是一个巨大的挑战。近日,中国科学院深圳先进技术研究院蔡林涛和马轶凡等研究人员,开发了一种新的生物正交标记策略,利用蛋白质合成途径来标记和追踪无包膜病毒。结果表明,在病毒蛋白的生物合成和组装过程中,l-叠氮高丙氨酸(AHA)取代蛋氨酸残基,比叠氮糖更能有效地将叠氮基序引入病毒衣壳蛋白中。叠氮修饰的EV71(N3-EV71)颗粒随后通过原位生物正交反应被二苯并环辛基(DBCO)功能化的荧光探针有效地标记,并具有良好的病毒感染性。双标记成像清楚地表明,EV71病毒粒子主要与清道夫受体结合,并通过网状蛋白介导的内吞作用内化。然后病毒颗粒被运送到早期和晚期的内吞体内,在那里病毒RNA在感染后大约70分钟以低pH依赖的方式释放。这些结果首先揭示了病毒的转运和脱衣机制,该研究有助于阐明EV71感染的发病机制,并有助于抗病毒药物的发现。

                                             

Fangfang Wang, Hong Pan, Xiangjie Yao, et al. Bioorthogonal Metabolic Labeling Utilizing Protein Biosynthesis for Dynamic Visualization of Nonenveloped Enterovirus 71 Infection. ACS Applied Materials & Interfaces, 2020.

DOI: 10.1021/acsami.9b17412

https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acsami.9b17412




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