Biosensors and Bioelectronics：PM Q探针:一种荧光结合蛋白，可将许多抗体转化为荧光生物传感器

先知报道

2020-07-05

猝灭体(Q-body)是一种荧光生物传感器，在抗体的抗原结合位点附近标记荧光染料。染料的荧光被存在于抗体可变区域的色氨酸残基淬灭，并在抗原结合时被恢复。利用重组DNA技术，在Fab的N端或抗体的单链可变区域片段上引入一个或多个标记序列，并用荧光染料标记Q-body。然而，制备重组抗体片段是费时的，Q-body的性能是不可预测的。有鉴于此，日本东京工业大学的Hiroshi Ueda等研究人员，报道一种由生殖支原体蛋白M制成的抗体结合猝灭探针，它可以将IgG抗体转化为免疫传感器。

本文要点

1）利用细菌表达纯化的M蛋白，在C端标记含有半胱氨酸的标记，制备TAMRA标记的PM Q探针。

2）当Q探针与识别骨Gla蛋白的Fab或IgG孵养时，探针的荧光被抑制，随后通过加入抗原剂量依赖性的方式恢复。

3）还成功检测了几个纳摩尔敏感性的小生物标记物，包括从人血清中提取的甲状腺素。

4）适于检测皮质醇的克隆也被证实作为重组Q-body，在50%的人血清中也起作用。

结果表明，Q探针可以快速将IgG转换为生物传感器，这将有助于小生物标志物的快速诊断。

参考文献：

Jinhua Dong, et al. PM Q-probe: A fluorescent binding protein that converts many antibodies to a fluorescent biosensor. Biosensors and Bioelectronics, 2020.

DOI：10.1016/j.biomaterials.2020.120220

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S095656632030419X