JACS：通过质谱分析了钠离子对G蛋白偶联受体配体结合和构象的影响

先知报道

2021-03-18

利用质谱来研究蛋白质已经很成熟，并且为可溶性和膜蛋白组装提供了宝贵的信息。然而，在生理条件下维持短暂的非共价相互作用仍然具有挑战性。有鉴于此，牛津大学的Carol V. Robinson等研究人员，通过质谱分析了钠离子对G蛋白偶联受体配体结合和构象的影响。

本文要点

1）研究人员使用纳米级电喷雾电离发射器建立了在含有高浓度钠离子的缓冲液中质谱测定两个G蛋白偶联受体（GPCR）的条件。

2）对于A类GPCR，腺苷2A受体，研究人员观察到在单个钠离子水平上配体诱导的受体钠结合的改变。研究人员发现拮抗剂促进钠结合，而激动剂减弱钠结合。

3）这些发现与高分辨率X射线结晶学一致，即只有不活跃的构象才能将钠离子保留在变构结合囊中。对于胰高血糖素受体（B类GPCR），研究人员观察到在含有高浓度钠的电喷雾缓冲液中配体结合增强，而不是乙酸铵缓冲液。综合运用天然和组学质谱揭示了亲脂负变构调节剂的存在。

本文研究强调了从含有高浓度生理相关盐的电喷雾缓冲液中实施天然质谱的优势，以告知变构离子或配体，有可能确定它们在GPCR功能中的作用。

参考文献：

Mark T. Agasid, et al. The Effects of Sodium Ions on Ligand Binding and Conformational States of G Protein-Coupled Receptors—Insights from Mass Spectrometry. JACS, 2021.

DOI：10.1021/jacs.0c11837

https://pubs.acs.org/doi/10.1021/jacs.0c11837